RNA導(dǎo)向的DNA甲基化（RdDM）途徑是高等植物基因組甲基化的重要途徑。在該途徑中，植物獨(dú)有的兩個(gè)RNA聚合酶（Pol IV和Pol V）發(fā)揮了核心作用。Pol IV和Pol V作為真核生物的第四個(gè)和第五個(gè)多亞基RNA聚合酶，其基因轉(zhuǎn)錄區(qū)域、轉(zhuǎn)錄起始、延伸和終止機(jī)制、轉(zhuǎn)錄調(diào)控方式均和Pol I、 Pol II和Pol III有較大區(qū)別。Pol IV轉(zhuǎn)錄的獨(dú)特之處在于， Pol IV能夠與RDR2形成復(fù)合物，直接以雙鏈的基因組DNA為模板催化dsRNA的合成。雖然植物Pol IV和Pol V于2005年被發(fā)現(xiàn)，然而其三維結(jié)構(gòu)仍然未被報(bào)導(dǎo)，大大阻礙了Pol IV和Pol V的進(jìn)一步深入研究。
近期，中國(guó)科學(xué)院分子植物科學(xué)卓越創(chuàng)新中心張余研究團(tuán)隊(duì)和王佳偉研究團(tuán)隊(duì)以及浙江大學(xué)馮鈺團(tuán)隊(duì)在《Science》發(fā)表了合作研究成果“Pol IV and RDR2: A two-RNA-polymerase machine that produces double-stranded RNA”. 該研究解析了Pol IV-RDR2蛋白復(fù)合物的三維結(jié)構(gòu)，并提出了Pol IV-RDR2以雙鏈DNA為模板合成雙鏈RNA的獨(dú)特分子機(jī)制。
Pol IV-RDR2的三維結(jié)構(gòu)以及二者高效合作合成雙鏈RNA的機(jī)制
這項(xiàng)工作首次揭示了真核生物第四個(gè)多亞基RNA聚合酶的三維構(gòu)造，闡明了兩種RNA聚合酶Pol IV和RDR2協(xié)作轉(zhuǎn)錄的獨(dú)特分子機(jī)制，回答了RdDM途徑中雙鏈RNA如何合成的科學(xué)問(wèn)題。這一研究結(jié)果拓展了真核生物RNA聚合酶結(jié)構(gòu)和功能的多樣性，加深了我們對(duì)植物表觀遺傳機(jī)制的理解。
全式金點(diǎn)突變系列產(chǎn)品Fast Mutagenesis System (FM111)助力該項(xiàng)研究。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：
1、由于采用部分重疊引物 (均含突變點(diǎn)) 設(shè)計(jì)，使PCR呈指數(shù)擴(kuò)增， 擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳可見(jiàn)，擴(kuò)增產(chǎn)物為環(huán)狀，易于轉(zhuǎn)化；
2、使用2×TransStart? FastPfu Fly PCR SuperMix擴(kuò)增，縮短了擴(kuò)增時(shí)間，同時(shí)提高了擴(kuò)增的保真性；
3、利用體外限制性內(nèi)切酶和體內(nèi)感受態(tài)細(xì)胞降解甲基化質(zhì)粒模板，突變效率更高，對(duì)照突變效率高達(dá)90%。
全式金產(chǎn)品一次次登上CNS，是對(duì)全式金人的鼓舞與認(rèn)可。未來(lái)我們將繼續(xù)秉承“品質(zhì)高于一切，精品服務(wù)客戶”的理念，堅(jiān)持創(chuàng)新與自主研發(fā)，提供高品質(zhì)的產(chǎn)品。
