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TransDetect? qPCR Mycoplasma Detection Kit

支原體檢測(cè)試劑盒 (qPCR法)

目錄號(hào)規(guī)格單價(jià)
FM321-0050 rxns9240
FM321-01100 rxns18480
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產(chǎn)品詳情介紹

本產(chǎn)品采用TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)支原體DNA,用于定性檢測(cè)如培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)物、生物制品等樣品中的支原體污染??蓹z測(cè)的支原體種類涵蓋范圍廣,包括柔膜菌綱(Mollicutes)下的多種支原體(Mycoplasma spp.)、無(wú)膽甾原體(Acholeplasma spp.)、螺原體(Spiroplasma spp.)等。本試劑盒按照EP 2.6.7和JP G3支原體檢測(cè)相關(guān)指南和要求進(jìn)行驗(yàn)證。

本試劑盒中的TransDetect? qPCR Mycoplasma SuperMix組分包含Taq熱啟動(dòng)酶、針對(duì)支原體檢測(cè)特殊優(yōu)化的qPCR反應(yīng)緩沖液、dNTPs、PCR增強(qiáng)劑、穩(wěn)定劑。此外,本反應(yīng)液引入了dUTP/UDG系統(tǒng),可在反轉(zhuǎn)錄前降解含U的ssDNA和dsDNA,消除由PCR產(chǎn)物導(dǎo)致的交叉污染。Primer&Probe Mix為擴(kuò)增支原體序列和擴(kuò)增Internal Control的引物、探針。FAM通道檢測(cè)支原體特異性擴(kuò)增;VIC通道檢測(cè)Internal Control的擴(kuò)增。Internal Control可PCR 反應(yīng)階段加入,排除因 樣品中含有PCR抑制因素導(dǎo)致的假陰性結(jié)果;內(nèi)部對(duì)照(IC)也可在樣品提取階段加入,以評(píng)估提取效果,排除DNA提取不當(dāng)而導(dǎo)致的假陰性。本試劑盒與支原體DNA提取純化試劑盒MagicPure? 32 Mycoplasma DNA Kit(EH401-32)配套使用,高效提取樣品中的支原體DNA,檢測(cè)限可達(dá)到10 CFU/ml。



產(chǎn)品組成

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實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

靈敏度高

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10種10 CFU/mL支原體標(biāo)準(zhǔn)株DNA的擴(kuò)增結(jié)果顯示,TransGen產(chǎn)品在檢出限10 CFU/mL濃度下,檢出率可達(dá)到100%。(擴(kuò)增圖是發(fā)酵支原體標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)結(jié)果展示)


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以上物種基因組DNA的擴(kuò)增結(jié)果均為陰性,表明TransGen產(chǎn)品特異性高,與非支原體物種無(wú)交叉反應(yīng)。


耐用性高

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分別用以上基質(zhì)稀釋陽(yáng)性支原體懸液,對(duì)照基質(zhì)為無(wú)核酸酶水,DNA提取后進(jìn)行qPCR檢測(cè)。結(jié)果表明,各基質(zhì)組的Ct值與對(duì)照接近, Ct值滯后不超過(guò)0.6,上述基質(zhì)對(duì)支原體檢測(cè)無(wú)明顯影響。


凍融穩(wěn)定性高

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TransGen產(chǎn)品反復(fù)凍融5次、10次、15次,產(chǎn)品性能不受影響。


穩(wěn)健性好

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TransGen產(chǎn)品可以耐受20%的引物或擴(kuò)增Mix的加樣誤差,不影響結(jié)果判斷。


儀器兼容性廣

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AG: 精氨酸支原體質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品           LA:萊氏無(wú)膽甾原體質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品

以不同濃度的精氨酸支原體和萊氏無(wú)膽甾原體的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品為模板,在不同儀器上進(jìn)行擴(kuò)增得到的Ct值。結(jié)果顯示,TransGen產(chǎn)品兼容性高,可適用于不同機(jī)型熒光定量qPCR儀。對(duì)于接近檢出限(1 copy/μL)的弱陽(yáng)樣本,均可穩(wěn)定檢出。



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